亚洲人色婷婷成人网站在线观看,无码精品A∨在线观看中文,国产香蕉一区二区三区在线视频,欧美性猛交╳XXX富婆

網(wǎng)站首頁技術(shù)中心 > 如何正確使用凋亡檢測試劑盒?
產(chǎn)品目錄
如何正確使用凋亡檢測試劑盒?
更新時間:2022-10-19 點(diǎn)擊量:1158
  細(xì)胞凋亡是細(xì)胞的基本特征之一,在機(jī)體的胚胎發(fā)育、組織修復(fù)、內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定等方面都起到十分重要的作用。Annexin V是一種分子量為35.8 KD的Ca2+依賴性磷脂結(jié)合蛋白,能與細(xì)胞凋亡過程中翻轉(zhuǎn)到膜外的磷脂酰絲氨酸(Phosphatidylserine,PS)高親和力特異結(jié)合。FITC-Annexin V結(jié)合到凋亡細(xì)胞后,在藍(lán)色光的激發(fā)下,發(fā)出綠色熒光,區(qū)分出凋亡細(xì)胞與正常細(xì)胞。碘化丙啶(Propidium iodide,PI)是一種核酸染料,它不能穿透完整細(xì)胞膜,但對凋亡晚期細(xì)胞和死細(xì)胞的破損細(xì)胞膜能夠穿透,并使細(xì)胞核紅染。將FITC-Annexin V與PI匹配使用,可以將凋亡早期的細(xì)胞和晚期的細(xì)胞區(qū)分開來。
 
  凋亡檢測試劑盒的操作方法:
 
  1.組織經(jīng)福爾馬林固定后會產(chǎn)生廣泛的蛋白質(zhì)交連,因此石蠟組織進(jìn)行凋亡檢測時要進(jìn)行預(yù)處理。經(jīng)我公司科研人員的長期研究認(rèn)為:TUNEL染色時蛋白酶K的作用有可能引起內(nèi)源性核酸內(nèi)切酶的釋放,造成假陽性反應(yīng),同時過量的蛋白酶K處理可破壞組織的結(jié)構(gòu),用微波技術(shù)替代上述處理可避免上述弊端的出現(xiàn)。
 
  2.微波已被愈來愈多地作為免疫組織化學(xué)和原位雜交的預(yù)處理過程,經(jīng)一定溫度的微波處理可修復(fù)因固定和包埋造成的抗原破壞,打斷氨基酸的肽鍵結(jié)合,促進(jìn)抗原決定簇的暴露,恢復(fù)細(xì)胞膜的空間結(jié)構(gòu),增加穿透效應(yīng),加速組織處理及染色過程。我們在作TUNEL染色前進(jìn)行微波修復(fù),可以達(dá)到蛋白酶K的功效,取得較為理想的效果,背景染色很淺,凋亡細(xì)胞陽性顆粒與背景染色對比非常鮮明。
 
  3.蛋白酶K作用的條件嚴(yán)格,消化度常因組織的不同而在操作中不便掌握。同時蛋白酶K的價格昂貴,而微波已作為一種常用儀器用于免疫組織化學(xué)染色中。
 
  (1)切片常規(guī)脫蠟入水
 
  (2)將一燒杯盛200ml的0.01M、pH6.0的檸檬酸緩沖液,加熱至90~95℃,迅速放入切片,使用680W(80%功率)、微波照射1min,加入雙蒸水(20~25℃)80ml作迅速冷卻,將玻片移至PBS(20~25℃)。(3)PBS洗5min×3次。
 
  (4)加20%正常牛血清室溫30min。
 
  (5)將TUNEL反應(yīng)混合液加在切片上,37℃溫育90min(陰性對照片、TUNEL混合液中不加TDT)。
 
  (6)PBS洗5min×3次。
 
  (7)3%H2O2甲醇液室溫阻斷10min。
 
  (8)37℃溫育90min。
 
  (9)加POD轉(zhuǎn)化劑,37℃溫育30min。
 
  (10)PBS洗5min×3次。
 
  (11)DAB/H2O2顯色。
 
  (12)蘇木素淡染,常規(guī)脫水,透明,中性樹膠封固。
 
  結(jié)果:細(xì)胞核呈棕色顆粒者為陽性細(xì)胞,結(jié)合形態(tài)特征,可確立凋亡細(xì)胞。陰性對照片無棕色顆粒。

滬公網(wǎng)安備 31011802001677號

免费无遮挡无码永久视频| 熟妇人妻一区二区三区四区| 亚洲精品乱码久久久久久不卡| 天干天干天啪啪夜爽爽99| 被老外做的下身都肿了| 一本色道久久88综合亚洲精品| 被体育老师抱着C到高潮| 99久久大香伊蕉在人线国产| 波多野结衣AV无码| 师娘求放过完整高清在线看| 业余 自由 性别 成熟偷窥| 人妻互换共享4P闺蜜疯狂互换| 学长上课揉搓捏掐我奶H| 国模无码视频一区二区三区| 天堂网在线最新版WWW中文网| 亚洲乱妇亚洲乱妇XINGLU| 久久久无码一区二区三区| 久久久久久精品无码人妻| 国产精品久久久久久久久无码| 高清VPSWINDOWS另类乱| 色偷偷色偷偷色偷偷在线视频| 亚洲午夜精品久久久久久浪潮| 荫蒂添的好舒服A片| 玩弄少妇人妻| 一层一层剥掉女生的衣服的游戏| 久久精品无码一区二区日韩av| 欧美老人巨大XXXX做受| 黑人狂躁中国人的A片| 小蓝视频男男勇敢做自己最新| 亚洲综合激情五月丁香六月| 小寡妇好紧进去了好大看视频| 阿娇跪下吃J8图片| 中国XXXXXLMEDJYF| 女人夜夜春高潮爽A∨片| 成熟丰满熟妇高潮XXXXX| 少妇人妻偷人精品一区二区| 久久久久久亚洲精品不卡| 宝贝的小嫩嫩好紧好爽H| 民工把我奶头掏出来了怎么办| 久久18禁高潮出水呻吟娇喘| 男人10处有痣是富贵痣|